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第三，通过体外 TNAP 切割实验和体内肝脏过表达 GPLD1 实验，证实 TNAP 是 GPLD1 的直接底物，GPLD1 可切割并降低老年小鼠海马血管的 TNAP 表达与活性，也就是说运动诱导的肝脏 GPLD1 能精准作用于脑血管的 TNAP 蛋白。
此外，研究持续一年后进行的评估显示，有氧运动组受试者的大脑预测年龄差数值呈现下降趋势，而对照组的这一数值则有轻微上升。平均而言，有氧运动组的大脑预测年龄差数值降低了约0.6岁，这表明，随访他们时其大脑呈现出更年轻的状态。而对照组的大脑预测年龄差数值看似增加了约0.35岁。当然，这一变化在统计学上并不显著。但整体而言，两组人的大脑年龄差异接近一岁，表明有氧运动组的大脑年轻化比较明显。
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